Il Guardiano Shroob è uno Shroob apparso in Mario & Luigi: Fratelli nel Tempo. Sono i protettori dell'Astronave Madre Shroob. I Guardiani Shroob sono bianchi con delle macchie blu sulla testa. Hanno delle bocche sempre aperte con due zanne bianche al loro interno.
Durante l'attacco del Regno dei Funghi, i Guardiani Shroob vengono incaricati di sorvegliare l'Astronave Madre Shroob per evitare l'attacco di eventuali intrusi. In battaglia sono più veloci e più forti dei comuni Shroob, e ognuno di loro può chiamare un altro Guardiano Shroob come aiutante durante la battaglia. I Guardiani Shroob possono attaccare come i normali Shroob, oppure possono attaccare due o addirittura quattro alla volta. Solo due appaiono sul campo, e solo un totale di nove appaiono in tutto il gioco. Poiché dopo la prima visita non sarà più possibile raggiungere l'Astronave madre, i Guardiani Shroob non possono essere combattuti di nuovo.
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